第三节提取与分离
一、总生物碱的提取
（一）脂溶性生物碱的提取
1.水或酸水提取法
常用0.5%—1%的盐酸或硫酸，采用浸渍法或渗漉法提取。
①阳离子树脂交换法
②萃取法
2.醇类溶剂提取法
提取方法可采用浸渍法、渗漉法、回流提取法和连续回流提取法。
3.亲脂性有机溶剂提取法
用亲脂性有机溶剂提取之前，必须将中药用碱水（石灰乳、碳酸钠溶液或稀氨水）湿润，使生物碱游离，再用亲脂性有机溶剂萃取。提取方法多采用浸渍法、回流提取法或连续回流提取法。
二、生物碱的分离
（一）初步分离
将总生物碱按碱性强弱、酚性有无及是否水溶性，初步分离为5个部分。
例题：含下列生物碱的中药酸水提取液，用氯仿萃取，可萃取出的生物碱是
A.苦参碱 B.氧化苦参碱 C.秋水仙碱 D.麻黄碱 E.山莨菪碱
答案：C
（二）生物碱单体的分离
1.利用生物碱碱性的差异进行分离
采用pH梯度萃取法分离。
一种方法是将总碱溶于稀酸水中，逐步加碱液调节pH，使pH由低到高，每调节一次pH，用氯仿萃取数次，从而将碱性由弱到强的生物碱依次转溶于氯仿而得以分离。
另一种方法是将总生物碱溶于氯仿中，用pH由高到低的酸性缓冲液依次萃取，使生物碱按碱性由强酸性缓冲液中；然后分别将各部分酸性缓冲液碱化，用氯仿萃取得到不同碱性的生物碱。
2.利用生物碱及其盐的溶解度差异进行分离
①苦参碱和氧化苦参碱
苦参碱的极性小于氧化苦参碱，前后能溶于乙醚，而后者难溶于乙醚
②汉防己甲素和汉防己乙素
两者的基本结构相似，仅一个取代基团的差异，后者为酚羟基，前者为甲氧基，故后者的极性大于前者。汉防己乙素难溶于苯，而汉防己甲素可溶于冷苯。
③麻黄碱和伪麻黄碱
两者为一对光学异构体，前者的草酸盐较后者的草酸盐在水中的溶解度小。将麻黄碱和伪麻黄碱溶于适量水中，加入一定量草酸，麻黄碱生成草酸盐即先从水溶液中析出。
A.麻黄碱 B.番木鳖碱 C.奎宁 D.奎尼丁 E.金鸡尼丁
1.可利用其硫酸盐在水中的溶解度小进行分离C
2.可利用其盐酸盐在水中的溶解度小进行分离B
3.可利用其酒石酸盐在水中的溶解度小进行分离E
4.可利用其氢碘酸盐在水中的溶解度小进行分离D
5.可利用其草酸盐在水中的溶解度小进行分离A
3.利用生物碱特殊官能团进行分离
常见的有酚羟基、羧基、内酯或内酰胺结构等官能团。可利用这些官能团进行分离。
4.利用色谱法进行分离
（1）吸附柱色谱：常用氧化铝和硅胶作吸附剂，以亲脂性有机溶剂为洗脱剂。
（2）分配柱色谱：以硅胶为支持剂，酸性缓冲液为固定相。
三、生物碱的色谱鉴别
（一）薄层色谱
1.吸附薄层色谱法
（1）吸附剂硅胶、氧化铝。
（2）展开剂
（3）显色观察
多数生物碱的薄层色谱需用改良碘化铋钾试剂喷洒，显示桔红色斑点。
（4）应用范围
硅胶和氧化铝薄层色谱适用于分离和检识脂性生物碱。
2.分配薄层色谱法
（1）支持剂硅胶、纤维素。
（2）固定相
对于脂溶生物碱的分离，多以甲酰胺为固定相；水溶性生物碱或生物碱盐则以水作固定相。
（3）展开剂
分离脂溶性生物碱，应以亲脂性有机溶剂作展开剂。分离水溶性生物碱，则应以亲水性的溶剂作展开剂，如BAW系统[正丁醇-乙酸-水（4:1:5），上层]。
（4）应用范围
以甲酰胺为固定相的薄层色谱，适于分离弱极性或中等极性的生物碱，以水为固定相的薄层色谱，适于分离水溶性的生物碱。
（二）纸色谱
1.固定相：①水；②甲酰胺；③酸性缓冲液。
2.展开剂：以水作固定相的纸色谱，宜用亲水性溶剂系统作展开剂，如BAW[正丁醇-乙酸-水（4:1:5），上层]；以甲酰胺和酸性缓冲液作固定相的纸色谱，多以亲脂性有机溶剂系统作展开剂。
3.显色剂
4.应用范围：纸色谱法多用于水溶性生物碱、生物碱盐和弱亲脂性生物碱的分离检识。
（三）高效液相色谱
（四）气相色谱
气相色谱主要适用于挥发性化合物的分析，如麻黄生物碱、烟碱等。
