痔康片含量测定方法
痔康片处方为:金银花,槐花,地榆炭,黄芩,大黄。
2005《中国药典》痔康片含量测定项下:
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水-冰醋酸(30:70:2)为流动相;检测波长为260nm。理论板数按芦丁峰计应不低于1500。
供试品溶液的制备:取本品20片,除去包衣,研细,取约0.2g,精密称定,置索氏提取器中,加甲醇适量,置80℃水浴中,加热回流提取4小时至提取液近无色,放冷,转移至100ml量瓶中,用少量甲醇洗涤容器,洗液并入同一量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
龙新华等测定痔康片中芦丁的含量,采用高效液相色谱法, Waters高效液相色谱仪。色谱柱为Bondapak C1810μm,3.9×300mm,柱温为室温,流动相:甲醇-水-冰醋酸(40:57.5: 2.5), 流速:1ml/m in,检测波长为254nm。样品用甲醇超声提取后通过聚酰胺层析柱处理,依次用水,20%乙醇溶液各50ml冲洗,弃去冲洗液,再用50%乙醇50ml 洗脱, 收集洗脱液过滤。结果芦丁的平均加样回收率为99.16%,RSD为2.22%。
银杏叶片含量测定方法
银杏叶片为银杏叶提取物经加工制成的片。
2005版《中国药典》含量测定项下:
总黄酮醇苷
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-0.4%磷酸溶液(50:50)为流动相;检测波长为360nm。理论板数按槲皮素峰计应不低于2500。
供试品溶液的制备:取本品10片,除去包衣,精密称定,研细,取约相当于总黄酮苷19.2mg的粉末,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇20ml,密塞,称定重量,超声处理(功率250W,频率33kHz)20分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液10ml,置 100ml锥形瓶中,加甲醇10ml,25%盐酸溶液5ml,摇匀,置水浴中加热回流30分钟,迅速冷却至室温,转移至50ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
萜类内酯
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以正丁醇-四氢呋喃-水(1:15:84)为流动相;用蒸发光散射检测器。理论板数按白果内酯峰计应不低于2500。
供试品溶液的制备:取本品10片,除去包衣,精密称定,研细,取约相当于萜类内酯19.2mg的粉末,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,密塞,称定重量,超声处理(功率250W,频率33kHz)20分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液20ml,回收甲醇,残渣加水10ml,置水浴中温热使溶散,加2%盐酸2滴,用醋酸乙酯振摇提取4次(15ml,10ml,10ml,10ml),合并提取液,用 5%醋酸钠溶液20ml洗涤,分取醋酸钠液,用醋酸乙酯10ml洗涤。合并醋酸乙酯提取液及洗液,用水洗涤2次,每次20ml,合并水液,用醋酸乙酯 10ml洗涤,合并醋酸乙酯液,回收至干,残渣哟功能甲醇溶解并转移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。
测定总黄酮苷含量时常用的流动相系统一般加入磷酸调节pH值,如:李芳等用HPLC法测定银杏叶片剂中总黄酮苷的含量,采用Waters 高效液相色谱仪。色谱柱为 Spherisorb C18φ(100mm×4.6mm,5μm),检测波长:370mm,流动相:甲醇-0.3%H3PO4 溶液(40:60),流速:1ml/min,柱温:40℃。样品用甲醇超声处理。结果槲皮素在0.28~2.52μg之间线性关系良好,相关性显著,平均加样回收率为101.1%,RSD=2.69%。
测定黄酮含量时有采用HPLC法,也有紫外分光光度法,如:陶巧凤等采用HPLC测定了11个制药公司的15批银杏叶片的黄酮(槲皮素 、山奈酚 、异鼠李素)的含量,采用Waters 高效液相色谱仪。色谱柱为Nova-pak C18(4μ) 200×4mm(大连化物所),流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液(1:1),检测波长360nm,柱温为室温。样品用甲醇超声处理后,用4%硫酸溶液水解。丁青龙等用紫外分光光度法,以芦丁为对照品测定银杏叶片剂中总黄酮的含量,测定波长为500nm,样品用70%乙醇回流提取。
测定内酯含量时,如:张雪琴等用HPLC法测定银杏叶片中银杏内酯的含量,采用HP1100高效液相色谱仪,色谱柱为Hypersil ODS2( 250mm×410mm, 5μm ),流动相:23%CH3OH水溶液,体积流量1.0mL/min,柱温25℃。理论塔板数以银杏内酯B计算不低于5000。样品用5%双氧水回流提取,滤过, 滤液用醋酸乙酯萃取多次, 萃取液用1%NaHCO3水溶液萃取多次后, 再用1%Na2SO3水溶液萃取, 醋酸乙酯层继续用蒸馏水和5%NaCl溶液萃取,醋酸乙酯萃取液回收溶剂,用50%CH3OH定容。
三七伤药片含量测定方法
三七伤药片处方为:三七52.5g,草乌(蒸)52.5g,雪上一枝蒿23g,冰片1.05g,骨碎补492.2g,红花157.5g,接骨木787.5g,赤勺87.5g。
2005《中国药典》川芎茶调丸含量测定项下:
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-水(20:80)为流动相;检测波长为283nm。理论板数按柚皮苷峰计应不低于8000。
供试品溶液的制备:取本品20片,除去糖衣,精密称定,研细,取约0.5g,精密称定,精密加入甲醇25ml,称定重量,超声处理(功率350W,频率50kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,离心,取上清液,即得。
文献报道的以芍药苷为指标的如:冯绍华等采用高效液相色谱法测定三七伤药片中芍药苷的含量,采用PC-3001高效液相色谱仪,色谱柱为Krom asilC18柱(4.6mm×250mm, 5μm),检测波长230nm,流动相为乙腈-水(13:87),流速1ml/min,柱温为室温。样品用甲醇超声提取,正丁醇、氨试液处理。结果芍药苷在8. 44ng/m l~105.5ng/ml之间呈良好的线性关系,回收率为98.24%,RSD=0.96%。吴海菁采用高效液相色谱法测定三七伤药片中芍药苷的含量,采用惠普HP1100Serier 系列高效液相色谱仪,色谱柱为Hypersil-ODS (5μm,250mm×4.0mm),流动相为甲醇-水-磷酸(30:70:0.2),流速1.0ml/ min,检测波长230nm。样品用甲醇超声提取。结果芍药苷的线性范围为1.06~5.30μg(r=0.9996),平均回收率100.7%,RSD =1.2%。邱少华等采用高效液相色谱法测定三七伤药片中芍药苷的含量,采用SP8800高效液相色谱仪,色谱柱为ODS-C18(250mm× 4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.1 %磷酸(17:83) ,检测波长230nm。样品用甲醇超声提取后,用中性氧化铝柱处理。结果芍药苷在10. 84~54.20 mg/L范围内呈良好线性关系( r = 0.9993),RSD为0.7%。平均回收率为99.1%,RSD为1.9%(n=5)。
以人参皂苷Rg1为指标的如:陈承英等采用反相高小液相色谱法测定三七伤药片中人参皂苷Rg1的含量,采用waters高效液相色谱仪,色谱柱为u-Bondapak C18(Radial PAK 8×100mm),流动相为乙腈-水(3:7),检测波长为210nm。样品用甲醇处理,结果平均回收率为101.84%,RSD=3.02%。
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